ЮНИТЕКА:

ИФА-исследования:

ПСА в скрининге рака предстательной железы

Куриляк О.А., к.б.н.

 

Серьезной проблемой для мужчин является рак предстательной железы. В настоящее время эта патология занимает первое-второе место среди онкологических заболеваний у мужчин в развитых странах. По данным ВОЗ число заболевших в мире за последние 20 лет увеличилось почти в 2 раза. Коварством данного заболевания является бессимптомное течение на ранних стадиях. Большей частью рак простаты выявляется только на III-IV стадии, когда эффективность лечения уже чрезвычайно низкая. Таким образом, выявление у мужчин рака предстательной железы на ранних стадиях заболевания представляет собой весьма актуальную задачу. В то же время классические методы клинической диагностики (пальцевое ректальное исследование, трансректальное ультразвуковое исследование, компьютерная томография) используются для обследования пациентов, уже имеющих урологическую симптоматику. Поэтому в настоящее время для ранней диагностики рака простаты все чаще используется определение в сыворотке крови специфических опухолевых маркеров. 

В 1979 году M.C.Wang и соавт. выделили из экстракта предстательной железы и описали новый гликопротеин, который оказался специфическим для эпительных клеток этой железы и был назван простатспецифическим антигеном. Установлено, что ПСА является одноцепочечным гликопротеином и относится к семейству человеческих калликреинов. У человека ПСА вырабатывается почти исключительно секреторным эпителием предстательной железы и, попадая в семенную жидкость, обеспечивает разжижение эякулята и увеличение подвижности спермы. На сегодняшний день простатспецифический антиген считается наиболее специфичным и чувствительным среди всех опухолевых маркеров. Он способен «выявлять» рак предстательной железы уже на IА стадии.

 

С 80-х годов в центральной Европе и США определение ПСА стало обязательным клиническим анализом, а уровень ПСА теперь является одним из самых широко используемых лабораторных параметров в онкоурологической диагностике. Речь идет о так называемом общем ПСА, т.е. ПСА, находящемся в сыворотке крови как в свободном, так и в связанном (с белками) состоянии. В нашей стране общепринятой тактикой считается определение сывороточного уровня ПСА, как минимум 1 раз в год, у всех практически здоровых мужчин старше 40 лет, у больных с урологическими жалобами, а также у более молодых мужчин, относящихся к группе высокого риска по развитию рака простаты (в эту группу входят мужчины, у которых отец или брат болели опухолями этой локализации, особенно в возрасте до 60 лет, а также у мужчин негроидной расы).

 

Определение уровня ПСА можно проводить с использованием радиоиммунного, иммуноферментного и иммунохемилюминисцентного методов. В настоящее время наибольшее распространение получили иммуноферментные методы как экологически более безопасные (по сравнению с радиоиммунными) и менее дорогостоящие (по сравнению с хемилюминисцентными). Для проведения исследования методом иммуноферментного анализа необходима комплектая ИФА-лаборатория, включающая шейкер-инкубатор, промывающее устройство и микропланшетный  фотометр.  Что же касается иммуноферментных наборов для определения ПСА, то можно отметить, что в настоящее время они производятся целым рядом зарубежных и российских производителей. Причем, отечественные наборы по своей точности и воспроизводимости не уступают импортным аналогам, а по стоимости анализа гораздо более экономичны.

 

Для анализа общего и свободного ПСА используют сыворотку, которая должна быть отцентрифугирована. Присутствие в сыворотке фибрина, эритроцитов или других посторонних частиц может вызвать недостоверные результаты. Сыворотка может храниться при температуре от +2 до +8оС до тестирования в течение 24 часов. Для более длительного хранения (не более 3 мес) она должна быть разделена на аликвоты и заморожена при –20оС или ниже. Следует избегать повторных циклов замораживания и размораживания сыворотки. После размораживания образцы тщательно перемешивают.

 

Клиничнеская интерпретация результатов исследований

В сыворотке крови большинства здоровых мужчин в возрасте до 45 лет уровень ПСА не превышает 4 нг/мл. Это значение и было выбрано в качестве дискриминационной концентрации большинством производителей тест-систем. С возрастом концентрация ПСА несколько увеличивается, поэтому были установлены возрастно-специфические дискриминационные уровни, позволяющие увеличить чувствительность этого маркера для мужчин молодого возраста и улучшить его специфичность для лиц пожилого возраста. Так, для мужчин моложе 49 лет дискриминационная концентрация была снижена до 2,5 нг/мл, для пациентов в возрасте от 50 до 59 лет – до 3,5 нг/мл, от 60 до 69 лет повышена до 4,5 нг/мл, а для мужчин старше 70 лет она может быть повышена до 6,5 нг/мл. Увеличениедискриминационной концентрации с возрастом вызвано возрастными гиперпластическими изменениями в предстательной железе.

 

ПСА находится в крови в различных формах – свободной и связанной. Свободная форма ПСА энзиматически неактивна. Активная форма ПСА в сыворотке связана в стабильные комплексы с ингибиторами протеаз, причем преобладающая часть связана с a1-антихимитрипсином (АХТ), небольшая часть ПСА связана с a2-макроглобулином.

 

Уровень общего ПСА в сыворотке крови у больных с заболеваниями предстательной железы (по данным МНИОИ им.П.А.Герцена) 

Диагноз

Средний уровень общего ПСА

(нг/мл)

Частота встречаемости значений общего ПСА при различных заболеваниях предстательной железы, %

< 4,0

нг/мл

4,0-19,9

нг/мл

20,0-30,0

нг/мл

>30,0

нг/мл

Простатит

1,83 ± 0,23

95,5

4,5

 

 

Аденома простаты

 

4,1 ± 0,39

 

67,0

 

33,0

 

 

Рак предстательной железы

 

419,0 ± 100,5

 

12,8

 

30,8

 

2,6

 

53,8

           

Как видно из представленной таблицы, уровень общего ПСА у больных с простатитом крайне редко (всего в 4,5 % случаев) превышает значение 4,0 нг/мл, причем эти значения не выходят за пределы «серой зоны» (4,0-19,9 нг/мл). При аденоме предстательной железы средний уровень общего ПСА составляет 4,1 нг/мл и частота «попадания» значений ПСА в «серую зону» увеличивается до 33%. У первичных больных раком предстательной железы среднее содержание общего ПСА в 100 раз превышает таковое у пациентов с аденомой и составляет 419,7 нг/мл, причем максимальные значения общего ПСА у отдельных больных могут превышать 7000,0 нг/мл. В целом, лишь у 12,8 % пациентов с первичным раком простаты уровень общего ПСА находится в пределах нормы, у 1/3 больных уровень ПСА располагается в «серой зоне», у большинства пациентов (53,3% случаев) значения ПСА превышают 30,0 нг/мл.

 

При дискриминационном уровне ПСА 4,0 нг/мл чувствительность* метода для диагностики рака простаты составляет 87,2%, специфичность** - 73,3%.

 

При значениях ПСА, находящихся в «серой зоне» (4,0-19,9 нг/мл) положительное прогностическое значение*** для выявления больных раком предстательной железы составляет 30,7%.

 

При уровне ПСА больше 20,0 нг/мл у больных, как правило, диагностируется рак предстательной железы. Таким образом, положительное прогностическое значение при концентрации ПСА больше 20,0 нг/мл близко к 100%.

 

Все выше сказанное свидетельствует о высокой диагностической значимости ценности метода определения уровня общего ПСА для скрининга рака предстательной железы. В то же время, очевидно, что для дифференциальной диагностики при значениях маркера в «серой зоне» (4,0 - 19,9 нг/мл), измерения только общего ПСА недостаточно, поскольку такое увеличение уровня белка может быть вызвано не только раком простаты, но и воспалением, доброкачественной гиперплазией, ишемией или инфарктом предстательной железы. В этих случаях для дифференциальной диагностики применяют клиническое, ультразвуковое, пункционное исследования. В последнее время для избежания ненужных биопсий все более активно используется методы неинвазивной серологической диагностики, основанные на оценке трех критериев: 1) плотности ПСА, 2) скорости увеличения ПСА во времени, 3) соотношения различных форм ПСА.

 

Исследования, выполненные в последние годы, ярко свидетельствуют о том, что наиболее точным и специфичным для дифференциальной диагностики признано соотношение серологических форм (свободной и общей) ПСА (ПСАсв/ ПСАобщ). Дело в том, что при раке простаты более высокая энзиматическая активность ПСА приводит к повышенному связыванию ПСА с ингибиторами. Более того, в ряде случаев даже при уровне общего ПСА меньше 4 нг/мл определение процентного содержания свободного ПСА может привести к ранней диагностике рака предстательной железы, что особенно важно для мужчин молодого возраста и существенно позволяет увеличить вероятность излечивания больных.

 

При определении соотношения серологических форм ПСА необходимо учитывать, что дискриминационное значение этой величины зависит от цели исследования. Так, если проводится скрининг для раннего выявления рака и необходимо достичь большей чувствительности, то дискриминационное значение соотношения свободной и связанной форм ПСА завышают. Напротив, если проводится дифференциальная диагностика и необходимо достичь большей специфичности, то пороговое значение соотношения форм ПСА необходимо снизить. Таким образом, следует использовать два дискриминационных уровня доли свободного ПСА: 15% (ниже которого вероятность наличия рака простаты очень велика) и 23% (выше которого вероятность наличия рака предстательной железы очень мала). По все возрастающему числу данных скрининг рака предстательной железы с учетом соотношения свободной и общей форм ПСА статистически более надежен, чем скрининг только по общему уровню ПСА и может снизить количество диагностических биопсий у пациентов с уровнем этого маркера в «серой зоне». Однако нужно учитывать, тот факт, что доля свободного ПСА имеет диагностическое значение главным образом для нелеченных больных, поскольку терапия может изменять этот показатель, например гормонотерапия зачастую повышает его.

 

При интерпретации результатов в обязательном порядке следует учитывать, что массаж, УЗИ и биопсия, а также цистоскопия предстательной железы могут вызывать существенное увеличение концентрации ПСА в крови. У некоторых пациентов изменение процентного содержания свободного ПСА вызывает пальцевое ректальное исследование. Поэтому рекомендуется брать кровь на исследование ПСА до того, как проводятся эти процедуры или через неделю после них (после биопсии – через 6 недель). Кроме того, следует избегать эякуляции за 48 часов до сдачи крови и поездок на велосипеде в течение нескольких дней до тестирования.

________________________________

* чувствительностьметода – процент истинно-положительных результатов, полученных с применением данного теста в группе онкологических больных.

**специфичность метода – процент истинно-отрицательных результатов, полученных с применением данного теста в группе неонкологических пациентов.

***положительное прогностическое значение – вероятность наличия у пациента злокачественной опухоли при положительном результате теста.

 

 

Список литературы

  1. Н.С.Сергеева, И.Г.Русаков, М.П.Мишунина, Н.В.Маршутина и др. «Роль простатспецифического антигена в диагностике и мониторинге больных раком предстательной железы». Пособие для врачей. М. 2000.
  2. Bangma C.H., Kranse R., Blijenberg B.G. et al.// Urology. – 1995. Vol. 46. – P.779-784.
  3. Noldus J., Stamey T.A.// J. Urol. – 1996. - Vol.155, № 2.– P.441 -443.
  4. Wirth M.P., Froschermailer S.E.//Urol. Res. – 1997. - - Vol. 25, suppl. 2.– P.67 - 71.
  5. Witherspoon L.R., Lapeyrolerie T.// J. Urol. – 1997. - Vol.157, – P.1322 - 1328.
Теги: